Bioruptor水槽式超声破碎仪与普通探头式超声仪一样,也存在超声能量会随着温度升高而急剧衰减的特性,超声发生器在工作的时候会产热,造成超声元件升温,从而导致超声能量下降,超声过程中超声能量的大小变化自然会影响实验的稳定性和重复性,所以,在实验开始时保证预冷到4摄氏度再开启超声,同时实验过程中不要一次性长时间超声,要多次停止超声保证充足的降温时间。这样子做既保证了实验的稳定高效,也保护了超声仪免受高温损伤,延长仪器使用寿命。
(五)Bioruptor的使用技巧
超声过程中保证充分的降温预冷
Bioruptor水槽式超声破碎仪与普通探头式超声仪一样,也存在超声能量会随着温度升高而急剧衰减的特性,超声发生器在工作的时候会产热,造成超声元件升温,从而导致超声能量下降,超声过程中超声能量的大小变化自然会影响实验的稳定性和重复性,所以,在实验开始时保证预冷到4摄氏度再开启超声,同时实验过程中不要一次性长时间超声,要多次停止超声保证充足的降温时间。这样子做既保证了实验的稳定高效,也保护了超声仪免受高温损伤,延长仪器使用寿命。
有些公共实验室,仪器会不断地被使用,超声仪很可能无法保证充分的降温,在排到自己使用的时候,建议不要着急开启超声,让仪器充分的降温遇冷至少半个小时再使用,不但对自己的实验有益,同时也保护了超声仪。
每次填满补齐超声管于适配器
Bioruptor超声破碎仪使用管架式的适配器,一次可以放置多个超声管,建议每次无论处理几个样品管都把空余的样品管孔用空白对照样品管补齐,保证每次超声每个超声管分配的超声能量是一样的,便于建立稳定的实验流程,这样子做的好处是,每次无论处理几个样品,按照稳定的实验流程都可以保证得出相同的超声效果。
三分法振荡离心样品管
特别针对于样品量非常少的体系,比如10ul,Bioruptor超声能量大,很容易就把样品管中微量的样品颠儿到管壁上,超声失效。所以要根据你的实验循环数定期振荡离心样品管,保证样品有效超声。比方说你要做15个循环,就把机器调整为5个循环,5个循环结束后,步进电机也停止转动,取出适配器,取出样品管振荡离心,然后再上机器处理5个循环,接下来同样取出适配器,取出样品管振荡离心,接下来再处理5个循环即可。同时也建议不要建立太微量的样品体系,尽量多一些,这样子就可以避开由于太多体积处于无效超声而导致实验结果不均一不稳定。
超声时间能少则少
超声时间不是越长效果就越好,如果通过10个超声循环就已经获得很好的实验结果,又加了1个循环并没有明显的改善,那么以后就只用10个超声循环即可。可想而知,在超声过程中超声波没有选择性地在破碎样品,超声破碎时间越长又可能导致过度超声或者产生更多的损伤等。所以能少超坚决不多超!
此文是博谊生物公司员工原创于2016年,首次发表于百度文库,目前已不知所踪,后续发表于生物器材网,文章名:Bioruptor 水槽式非接触式超声破碎仪心得体会。然后在网上被人到处发布,虽说是有伤知识产权,但是能够让更多人有所收获更彰显了此文的价值,博谊生物决定在官网分为6篇陆续发布。
上海博谊生物是一家以代理进口实验室仪器为主的专业设备公司,自成立以来,一直致力于提升国内实验室硬件水平以及为客户提供高效的实验解决方案。资深代理比利时Diagenode产品,Bioruptor Plus超声破碎仪做ChIP及细胞破碎等,Bioruptor Pico核酸打断仪用于NGS二代测序,Megaruptor DNA剪切仪用于三代测序等。