比利时 Diagenode公司Bioruptor Pico核酸剪切仪试用概述
Biorupter打断条件测试-2017.5.18.pdf
试用日期:2017年5月
试用单位:上海伯豪生物
试用详情:
Sample volume: 100 µl
Tubes: 0.65 ml Bioruptor® Microtubes (Cat. No. C30010013)
Tube holder: 0.65 ml tube holder & tube adaptor for Bioruptor® Pico (Cat. No. B01200010) for 12 x 0.65 ml tubes
DNA concentration: 0.1-10 ng/µl
Sonication buffer: TE (10 mM Tris, 1 mM EDTA), pH 7.5 - 8.0
Target size:150-1000bp
Sonication cycles: 按照厂家参考循环数
仪器已经预冷,陈老师准备样品……
结果分析:
DNA concentration: 1ng/µl
Target size:150bp
Sonication cycles: 30 cycles (30 sec ON/OFF)
试用结果:样品品质良好,超声效果理想。三个样品由于实际浓度有差别,所以波峰有高低。总体上波峰稍稍拖后。Pico仪器是市面上唯一一款60KHz的超声波破碎仪,片段极限在70bp。熟悉DNA打断实验的都知道,目的片段越小、浓度越高越难处理。之前在新培晶试用时,由于浓度太高(50 ng/µl),导致超声时间过长,效果一般。链接:http://www.boyibio.cn/news/html/?89.html
DNA concentration: 红1 ng/µl和蓝20ng/ul两个样品
Target size:250bp
Sonication cycles: 8 cycles (30 sec ON/90 sec OFF)
试用结果:样品品质良好,超声效果理想。厂家推荐浓度是(1-20ng/ul),在此范围内超声效果基本上是不变的。
DNA concentration: 2ng/µl
Target size:300bp
Sonication cycles: 6 cycles (30 sec ON/OFF)
试用结果:样品品质良好,超声效果理想。
DNA concentration: 红2ng/µl(有误),蓝10ng/µl,绿2ng/µl,青0.2ng/µl
Target size:400bp
Sonication cycles: 6 cycles (15 sec ON/90sec OFF)
试用结果:样品品质良好,超声效果理想。浓度方面应该有误,不影响分析,总的来说,超声重复性理想,青0.2ng/µl浓度太低没有检测到。
DNA concentration: 红1ng/µl,蓝9ng/µl
Target size:1000bp
Sonication cycles: 8 cycles (5sec ON/90sec OFF)
试用结果:样品品质良好,超声效果理想。波峰明显小于1kb,超声循环数需要减少1-2个循环。